細(xì)胞培養(yǎng)物污染往往是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室最常遇到的問(wèn)題,有時(shí)會(huì)帶來(lái)十分嚴(yán)重的后果。細(xì)胞培養(yǎng)污染物可分為兩大類(lèi):化學(xué)污染物,如培養(yǎng)基、血清和水中的雜質(zhì)、內(nèi)毒素、增塑劑和洗滌劑;生物污染物,如細(xì)菌、霉菌、酵母、病毒、支原體,以及其他細(xì)胞系的交叉污染。雖然不可能*消除污染,但通過(guò)*了解污染源并遵循良好的無(wú)菌消毒技術(shù),可以降低污染的頻率和嚴(yán)重性。
細(xì)胞培養(yǎng)箱是一種常用的實(shí)驗(yàn)設(shè)備,在使用過(guò)程中是以一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過(guò)大量培養(yǎng)成為簡(jiǎn)單的細(xì)胞或極少分化的多細(xì)胞的一個(gè)過(guò)程,整個(gè)過(guò)程對(duì)培養(yǎng)環(huán)境的要求極其嚴(yán)苛,為避免被微生物污染,細(xì)胞培養(yǎng)箱的清潔與消毒是不可少的。然而,針對(duì)培養(yǎng)過(guò)程中面臨的各種污染源,各細(xì)胞培養(yǎng)箱微生物的控制方式和效果不盡相同,對(duì)于細(xì)胞來(lái)說(shuō),非常理想的培養(yǎng)環(huán)境同樣也適合這些污染物的生存,培養(yǎng)箱本身是不會(huì)辨別的,而細(xì)胞培養(yǎng)中大部分時(shí)間里細(xì)胞都是位于培養(yǎng)箱內(nèi),因?yàn)橄潴w內(nèi)能否抑菌或滅菌非常關(guān)鍵!
01細(xì)胞培養(yǎng)微生物污染的原因:
1,取放細(xì)胞時(shí)引起的污染
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,取放細(xì)胞是最基本的操作,培養(yǎng)房開(kāi)關(guān)門(mén)的瞬間,環(huán)境中的微生物或多或少會(huì)進(jìn)入培養(yǎng)箱中,而且內(nèi)外溫差導(dǎo)致內(nèi)門(mén)冷凝水的產(chǎn)生,極易吸附微生物,都是造成培養(yǎng)箱污染的風(fēng)險(xiǎn)因素。
2,滅菌不*造成的二次污染
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,因其它操作問(wèn)題(如培養(yǎng)基潑灑,水盤(pán)污染等),造成培養(yǎng)房的大規(guī)模污染也時(shí)常會(huì)發(fā)生,此時(shí)就需要對(duì)培養(yǎng)箱進(jìn)行滅菌消毒,常規(guī)的消毒(如紫外照射)只能達(dá)到表面消毒的效果,特別是對(duì)真菌等頑固性污染,無(wú)法進(jìn)行*滅菌,導(dǎo)致后續(xù)培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞污染頻發(fā)。
02解決霉菌目前常用的消毒產(chǎn)品類(lèi)型:
常見(jiàn)成分:醇類(lèi)、醛類(lèi)、季銨鹽化合物、戊二醛、胍類(lèi)、過(guò)氧化氫、過(guò)氧乙酸以及新型過(guò)氧化氫銀離子等。市場(chǎng)上的消毒產(chǎn)品種類(lèi)很多,每種消毒產(chǎn)品也各有自己的優(yōu)勢(shì)和不足,在這種情況下了解消毒產(chǎn)品特性,根據(jù)自身的消毒要求選擇適合的產(chǎn)品十分重要。
殺菌劑是解決霉菌的有效的方式。然而,在選擇殺菌劑時(shí)需要特別小心,因?yàn)樵S多殺菌劑含有毒物質(zhì)(如汞、砷、醛類(lèi)等),這些物質(zhì)在室內(nèi)長(zhǎng)期應(yīng)用會(huì)對(duì)健康產(chǎn)生不良影響。表面活性劑/季銨鹽化合物的作用有局限性,只能有選擇性的殺滅部分霉菌,不能消除所有類(lèi)型的霉菌。含氯的殺菌劑產(chǎn)品會(huì)釋放刺激性氣味,在與酸接觸時(shí)會(huì)產(chǎn)生劇毒的氯氣。